藥用真菌高質量總DNA的制備及基因組文庫的構建

A METHOD FOR PREPARATION OF HIGH QUALITY GENOMIC DNA FROM MEDICINAL FUNGI AND CONSTRUCTION OF A GENOMIC LIBRARY

程度　黃翔宇　李寶健　

分類號：Q939.96 　文獻標識碼：A

文章編號：1007-3515(2002)01-0137-0139

　　靈芝、姬松茸、灰樹花等藥用真菌對腫瘤、肝炎、心血管疾病等具有良好的療效,已引起國際醫學界的矚目.現對藥用真菌的研究逐漸深入到分子水平,而提取基因組DNA是進行藥用真菌分子生物學研究的基本技術之一.目前適用于靈芝等擔子菌綱大型藥用真菌DNA提取的方法報道較少.按照曲霉等絲狀真菌DNA的提取方法提取靈芝、姬松茸、灰樹花的基因組DNA時,不但未能有效除去DNA的多糖,而且所得DNA片段小,構建文庫時的轉化率低.為此我們建立了一種快速提取高質量基因組總DNA的技術,并在此基礎上探索出一種構建高質量基因組文庫的方法,為以后進行有關的藥用真菌分子生物學研究奠定了基礎.……

基金項目：廣東省重點科技攻關項目(99-Z-021-01)

作者簡介：程度(1972),男,河南人,博士,從事藥用真菌的基因工程研究.E-mail:lsbrc12@zsu.edu.cn.

作者單位：程度（中山大學生物工程研究中心,廣州,510275）　

　　　　　黃翔宇（中山大學生物工程研究中心,廣州,510275）　

　　　　　李寶健（中山大學生物工程研究中心,廣州,510275）　

參考文獻：

［1］J.薩姆布魯克等,1989. 分子克隆實驗指南(第二版).金冬雁等譯(1999).北京,科學出版社.1～1062

［2］Donglu Zhang, et al., 1996. A method for the large scale isolation of high transformation efficiency fungal genomic DNA. FEMS Microbiology Letter 145:261-265

［3］HE YQ, 2000. An improved protocol for fungal DNA preparation. 菌物系統, 19(3):434