1.酸堿度調(diào)節(jié)
      一般用10%鹽酸或10%氫氧化鈉調(diào)pH值。用pH值試紙進(jìn)行測(cè)試。調(diào)pH值時(shí)要小心，一滴一滴地加酸或堿，不要調(diào)得過酸或過堿，以避免某些營(yíng)養(yǎng)成分被破壞。
      在食用菌菌絲生長(zhǎng)過程中，菌絲將碳水化合物分解成有機(jī)酸類，使培養(yǎng)基逐漸呈酸性；另外，有機(jī)酸類被同化后，培養(yǎng)基逐漸呈堿性。為防止培養(yǎng)基酸堿度出現(xiàn)大的波動(dòng)，常在培養(yǎng)基中加人少量磷酸鹽作為緩沖液。
      2.分裝
      培養(yǎng)基配好后，趁熱將其按需要分裝于三角瓶或試管內(nèi)，以免瓊脂冷凝。溫度低時(shí)，要保溫分裝。分裝時(shí)應(yīng)避免培養(yǎng)基黏附管口或瓶口。瓊脂若黏著棉塞，會(huì)影響接種，還易引起雜菌滋生。分裝用漏斗或橡膠管進(jìn)行。裝入三角瓶的培養(yǎng)基量，一般不要超過瓶容量的1/3；裝入試管中的量，最好不要超過管長(zhǎng)的1/5。
      3.塞棉塞
      分裝后，塞好棉塞。做棉塞用普通棉花，不要用脫脂棉。棉塞的作用是既通氣又過濾空氣，避免雜菌污染培養(yǎng)基。
      塞入試管的棉塞要緊貼管壁，不留縫隙，大小、松緊均勻適度。檢查松緊的方法是：將棉塞提起，試管跟著被提起而不下滑，表明棉塞不松；將棉塞拔出，可聽到有輕微的聲音而不明顯，表明棉塞不緊。
      4.捆把
      棉塞塞好后，每7支同樣規(guī)格的試管包扎成1把，試管棉塞部分要包上一層牛皮紙或雙層報(bào)紙，用繩捆扎在管壁或瓶頸上。包紙的作用是避免滅菌時(shí)冷凝水淋濕棉塞，并防止接種前培養(yǎng)基水分散失或被雜菌污染。
      5.滅菌
      試管包扎好后，放人鐵絲筐中，豎直放人高壓滅菌鍋內(nèi)滅菌。在壓力升至0.05MPa時(shí)排放冷空氣， 然后再在0.11MPa下滅菌20~30min。滅菌時(shí)間不能過長(zhǎng)，否則易破壞培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分，使酸度增加、凝固不良。滅菌后待溫度緩慢降到60℃時(shí)再擺成斜面，以防冷凝水在管內(nèi)積聚過多。
      6.擺斜面
      擺放方法是將1cm厚的木板或鋼板平放于平臺(tái)或地上，然后將滅過菌的試管口朝上擺放于板上冷卻凝固即成斜面培養(yǎng)基。擺放后在試管上覆蓋棉布保溫也可減少冷凝水過多。斜面長(zhǎng)度占試管總長(zhǎng)的1/2，最多不超過3/5。