根據各種食用菌生長時對營養物質的要求，用人工方法配制而成的營養基質，供菌絲生長發膏。把這種營養物質叫培養基。它如同農作物需要土壤、肥料，動物需要飼料一樣。
（一）培養基種類
目前，人們采用的培養基相當多，種類各不相同。不論哪種培養基都有共同特點：一般都含有水分、碳源、氮源、無機鹽以及生長因素等。水分是食用菌的組成成分，食用菌在生理活動中，需要在有水的情況下進行。
碳源是構成細胞物質的主要元素，也是食用菌生長發膏所需能量來源。碳源的主要原料是糖類、淀粉、纖維素物質。代表物質是葡萄糖、蔗糖、玉米粉、麩皮、米糠、鋸木、棉籽殼等。
氮源是食用菌細胞質和細胞核中蛋白質和核酸的主要元素，蛋白質和核酸是生命的基本物質。一切生命活動都離不開這些物質。氮源主要有氨基酸、蛋白胨、尿素、硫酸銀、含有氮素的物質有玉米、棉籽殼。
培養基中的無機鹽雖用量不多；但不可缺少。它主要是酶類的組成成分，調節各種生命代謝活動。如磷酸二氫鉀、硫酸鎂。
生長因素需要量很少，是培養基中的特殊營養物質，它是維持食用菌正常生長所不可缺少的生長因素。如馬鈴薯、 麩皮、米糠等都含有豐富的生長因素，維生素也屬此類。
根據營養物質的來源，黃年來等同志進行了細致的分類，把所有培養基分成三大類：
1.天然培養基：它是利用天然的有機物配制而成的培養基。這種培養基來源廣，成本低，很適合實胨生產。特別具備營養豐富、制備方便、經濟實用等優點。但他學成分不能定量，每批成分也不穩定，因此不宜用來進行精確的科學實驗。
常用的天然培養基，有馬鈴薯培養基、麥芽汁培養基、杏汁培養基、蘋果培養基、麥芽培養基、堆肥培養基等。
2.半合成培養基：在天然培養基中，適當增加無機鹽 類，或在合成培養基中添加少量別的有機物，成為半合成培養基，介于天然培養基和合成培養基之間。主要目的是促進菌絲生長發膏。
3.合成培養基：用化學成分已知的有機物或無機物配制而成的培養基。由于各種化學成分已經清楚，容易控制， 所以適合某些定性和定量研究。
（二）食用菌母種分高用培養基的制作
食用菌的母種就是從孢子分離培養或組織分高培養獲得的菌絲體。一般常在瓊脂培養基上培養。
1.馬鈴薯——蔗糖——球脂培養基（PDA）：
馬鈴薯煮汁 1000毫升
蔗糖 20克
瓊脂 20克
PH值 5.5～6.0
制法：先將新鮮無病害的馬鈴薯洗凈，去皮后切成小薄片，稱200克，加水1000毫升，煮沸20分鐘后過濾，其濾汁為馬鈴薯煮汁。然后加瓊脂和蔗糖煮溶，后補足水分至1000毫升，裝管（瓶）滅菌備用。
一般食用菌母種的分離和培養都適合此培養基。
2.葡萄糖——麥芽膏——酵母膏培養基（GMY）：
麥芽膏 10克
葡萄糖 11克
酵母膏 4克
瓊脂 18克
水 加至1000毫升
PH值 自然
麥芽膏可用麥芽汁代替，10克麥芽膏可用18克勃力克司濃度的麥芽汁600毫升代替。
3.黃豆餅粉培養基：
黃豆餅粉 40克
葡萄糖或蔗糖 20克
瓊脂 18克
水 1000毫升
PH值 自然
制法：稱黃豆餅粉40克用清水調成糊狀，再加水1000 毫升，煮沸后30分鐘，過濾，用熱水補足1000毫升，加入瓊脂蔗糖溶化即可分裝試管。
4.玉米粉培養基：
玉米粉 30克
蛋白胨 20克
蔗糖 20克
瓊脂 18克
水 1000毫升
pH值 自然
5.木汁麥麩（米糠）培養基：
麥麩（米糠） 100克
硫酸鐵 1克
蔗糖 20克
瓊脂 20克
水 1000毫升
pH值 5～6
制法：將木屑用雙層紗布包嚴煮沸20分鐘取出木屑包，補足1000毫升水，加入瓊脂、糖等拌勻溶化即可。
6.麥粒培養基：
小麥粒 200克
糖 5克
碳酸鈣 15克
水 500毫升
PH值 自然
制法：取小麥200克洗凈，置鍋中加水500毫升，煮沸20分鐘，加入其他成分，煮5分鐘，用紗布過濾，水汁分 裝至試管的 1／3長度為好。
7.杏汁培養基（適合樸菇子實體的發生）：
干杏 25克
瓊脂 15—30克
水 1000毫升
PH值 自然
8.胡蘿卜培養基（代替馬鈴薯）：
胡蘿卜 100克
糖 18～25克
瓊脂 20克
水 1000毫升
9.蘋果培養基（適于草菇生長）：
蘋果（壓碎） 100克
蛋白胨 2克
蔗糖 20克
瓊脂 20克
水 1000毫升
10.高粱培養基（特別適于平菇類生長）：
高粱粉 30克
瓊脂 10克
水 1000毫升
馬廄肥 150克
玉米粉（取湯） 30克
瓊脂 20～30克
水 1000毫升
12.酸性培養基（供分離菌種及培養猴頭菌）：
馬鈴薯（去皮） 200～250克
糖 20克
瓊脂 25克
檸檬酸 1％～5％（滅菌后加人）
水 1000毫升
（三）原種和栽培種培養料的制備
原種是由母種繁殖而來，進而制成栽培種，用于播種、生產。
1.糞草培養基（適于制作蘑菇菌種）：
糞草(糞：草=6：4、堆積發酵15～20天) 90斤
米糠或麩皮 8斤
碳酸鈣 1斤
糖 1斤
水 適量
2.麥粒培養基（適于制作蘑菇、鳳尾菇、毛木耳菌種）：
浸濕蒸透的麥粒 88％
木屑 10％
石膏 2％
水 50％一60％
3.木屑米糠培養基（適宜各種木生食用菌的制作）：
闊葉樹木屑 70％～80％
米糠或麩皮 20％～28％
碳酸鈣 1％
蔗糖 1％
石膏 1％
水 調至適量
4.棉皮培養基（平菇、鳳尾菇戶）
棉籽殼 99％
石膏粉 1％
5.玉米芯培養基：
玉米芯 99％
石膏粉 1％
6.稻草培養基：
稻草 94％
麩皮 5％
石膏 1％
蔗糖 1％
7.棉皮木屑培養基：
棉皮 78％
木屑 20％
蔗糖 1％
石膏 1％
水料比為 1.2～1.3：1
8.羊屎培養基（蘑菇）：
在侵漉屎中，加入1％～3％碳酸鈣或1％石灰。
9.玉米稈粉培養基:
玉米稈 78％
麩皮 21％
石膏 1％
（四）棉塞、牛皮紙蓋、衛生紙氣塞的制作
根據所栽培的品種選擇適宜培養基，然后即可將培養基分裝。
分裝是指瓊脂培養基分裝和原種、栽培種分裝。
裝好培養基的試管、三角瓶或菌種瓶，應立即塞上大小適合的棉塞，以防雜菌侵入培養基。所用的棉花、以白色長絨的不脫脂棉花為理想。也可用人造塑料海綿代替棉花作瓶塞，效果很好。棉塞表面要光滑，松緊度要適當。溫差變化比較大的地方，棉塞要塞緊一些。
制作棉花塞時，先把棉花鋪開，撕成5～6厘米寬的長條，用手握緊，粗度適當，棉塞要稍緊密，塞入后也不能起皺成溝。否則容易掉落，雜菌也容易跑進培養基。
塞好棉塞的空試管，可用烘干箱加熱到15℃左右，干熱滅菌1小時后備用。
菌種瓶棉塞和試管相同，只是粗細之別。
另外，缺少棉花的地方，可用雙層牛皮紙中間加一層棉花作瓶塞。
還可用耐高溫塑料紙作瓶塞。目前有些地方的菌種瓶是塑料紙中間打一小孔用膠布封嚴，接種時只要按操作把菌種放入小孔的辦法，也可采用。
母種試管口用衛生紙作透氣塞。裝好培養基后，試管口擦干凈，把衛生紙（普通或高級均可），卷成同試管口一樣粗細的筒，剪成5厘米長的小段，每段塞入試管內3厘米，外留2厘米，再扎成捆，用牛皮紙包嚴、滅菌。接種后還可用塑料膠布將試管口與衛生紙聯封。培養按常規辦法。
原種瓶或栽培種瓶用衛生紙作通氣寨時，先按一定配方裝滿瓶后，洗凈瓶內外壁，把衛生紙剪成5厘米寬條幅，每條卷成同瓶口一樣大小的簡，塞入瓶內3厘米，外留2厘米；滅菌后接種、培養。
塑料袋制種時，若用"兩頭"接種，裝料后扎緊兩頭，然后將衛生紙剪成3厘米長、1厘米粗的小卷，用牛皮紙包 嚴同塑料袋一起裝鍋滅菌，再放入接種箱消毒，操作時將袋口解開，接入菌種，再將衛生紙小卷夾在袋口中間，用線繩或皮筋扎緊即成。接種完畢后，按常規放入培養室管理。
用塑料袋生料栽培食用菌時，兩頭可用衛生紙作通氣塞。
通過我們多次試驗，衛生紙作透氣塞，不會像棉花那樣濕塞，避免了因濕塞而引起雜菌污染；衛生紙通氣性能好、吸水性強、雜菌少，蒸發到瓶口的水珠不易積于料面；以往我們用棉花、塑料環，成本高，工序多，用衛生紙可大大降低成本。
（五）培養基的滅菌
按上述培養基裝好后就要立即進行滅菌；將其中的雜菌殺死，然后才能接入我們所需要的純菌種，進行培養。
不論是母種分離時用的斜面培養基，還是原種、栽培種瓶培養基或聚丙烯塑料袋培養基，一般都采用熱力滅菌法。
高壓蒸汽滅菌法：若是斜面試管培養基。應先用牛皮紙扎成捆，標明棉塞為上端部分，然后豎直放入高壓鍋內，進行滅菌。在1．5公斤／平方厘米壓力下維持30分鐘，即可達到滅菌目的。開鍋取試管時，趁熱放成斜面。經試驗若無雜菌，可用。若有雜菌時，重新滅菌。
滅菌材料如是原種和栽培種，應在15公斤／平方厘米壓力保持60～90分鐘。這樣才能達到滅菌目的。達到所規 定的時間后，應停火并逐漸排去蒸汽。待壓力表的指針回復零位時，再把消毒鍋的螺栓旋開，打開蓋子，取出瓶子。停火排汽時必須注意，排汽閥不能一下子放大，只有一點一點開，讓壓力表慢慢地回復到原位，然后再揭鍋蓋。如果排汽過猛，鍋內壓力急速下降，則會造成棉塞脫落和玻璃容器破損。
常壓蒸汽滅菌法：如沒有具備高壓鍋，可用土蒸鍋或蒸籠進行。在常壓的條件下，以 100℃的溫度持續6-8小時，以殺死培養料中的各種雜菌。也可常壓間歇滅菌3次。可先蒸1小時，然后隔24小時又如法蒸1次，連續3次，就可達到滅菌目的。
培養基的滅菌效果要經常檢驗，是否滅菌徹底：一般情況下，滅菌后的培養基最好應放在要培養的溫度下，空白培養1周，可檢查滅菌效果。如果在這一段時間內培養基沒發生任何變化，說明滅菌效果良好，可以使用。
