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    雙孢蘑菇制種技術(shù)(一)


    【發(fā)布日期】:2004-09-10  【來(lái)源】:
    【核心提示】:第一節(jié) 培養(yǎng)基的制備一、配制原則和種類(一)培養(yǎng)基配制原則1、培養(yǎng)基:培養(yǎng)基是提供食用菌等生物生長(zhǎng)發(fā)育所需的營(yíng)養(yǎng)與特

    第一節(jié) 培養(yǎng)基的制備

    一、配制原則和種類

    (一)培養(yǎng)基配制原則

    1、培養(yǎng)基:培養(yǎng)基是提供食用菌等生物生長(zhǎng)發(fā)育所需的營(yíng)養(yǎng)與特定環(huán)境條件的基質(zhì),如蘑菇菌是有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型中的草腐生菌。制備培養(yǎng)基不僅要考慮它所需要的含碳化合物、含氮化合物、礦物鹽類、生長(zhǎng)因子,還要考慮水與pH環(huán)境,同時(shí)還應(yīng)考慮它們培養(yǎng)方式是固體培養(yǎng)還是液體培養(yǎng)。因此,可以把按菌類生長(zhǎng)發(fā)育需要比例配制的滅菌營(yíng)養(yǎng)基質(zhì),稱為培養(yǎng)基。換言之,培養(yǎng)基必須具備三個(gè)條件:含有菌株生長(zhǎng)發(fā)育所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);具有菌類生長(zhǎng)環(huán)境條件;經(jīng)過(guò)滅菌,并保持無(wú)菌狀態(tài)。

    2、培養(yǎng)基的選擇:在整菌種制備過(guò)程中,從母種到原種、栽培種,各個(gè)階段的目的要求有所不同,所選用的培養(yǎng)基的配比也應(yīng)有所區(qū)別。一般母種初生菌絲較嫩弱,分解養(yǎng)分能力差,要求營(yíng)養(yǎng)豐富、完全,氮源、維生素的比例應(yīng)高。須選用易于被菌絲吸收利用的物質(zhì),如葡萄糖、蔗糖、馬鈴薯、蛋白胨、無(wú)機(jī)鹽類及生長(zhǎng)素等為等而原種、栽培種所需數(shù)量較多,且菌絲分解能力強(qiáng),可利用大量農(nóng)作物秸稈、糞草、棉籽殼、麩皮、米糠等原料作為培養(yǎng)基。

    (二)培養(yǎng)基的種類

    1、根據(jù)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的來(lái)源,可以把培養(yǎng)基分炎天然培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。

    (1)天然培養(yǎng)基 天然培養(yǎng)基是指用化學(xué)成分還不清楚或化學(xué)成分不恒定天然有機(jī)物配制而成的培養(yǎng)基,如各種農(nóng)副產(chǎn)品及其下腳料──小麥、大豆、玉米粉、麩皮、米糠、  作物秸稈、木屑、棉籽殼、甘蔗渣等,以及動(dòng)植物組織的浸出液──牛肉膏、肉湯、馬鈴薯汁、麥芽汁、豆芽汁等都可以用來(lái)配制天然培養(yǎng)基,這種培養(yǎng)基來(lái)源廣,成本低,營(yíng)養(yǎng)豐富,適合于在生產(chǎn)上大規(guī)模培養(yǎng)菌類使用,但這些天然有機(jī)物質(zhì)因產(chǎn)地、品種、生長(zhǎng)期的不同,化學(xué)成分不能宣。每批成分也不穩(wěn)定,不宜用來(lái)做精細(xì)的科學(xué)實(shí)驗(yàn)。以分離馴化食用菌培養(yǎng)基

    (2)半合成培養(yǎng)基 為了促進(jìn)食用菌菌絲的生長(zhǎng)發(fā)育,常在天然培養(yǎng)基中添加適量的無(wú)機(jī)鹽類,或在合成培養(yǎng)基中添加適量的某些天然有機(jī)物,就成為半合成培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基種類繁多,應(yīng)用廣泛,也是生長(zhǎng)菌種和實(shí)際栽培最常用的培養(yǎng)基。

    (3)合成培養(yǎng)基 是指采用化學(xué)成分已知的有機(jī)物(碳水化合物、含氮化合物、有機(jī)酸類)或無(wú)機(jī)物配制而成的培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基組成和含量明確,價(jià)格較貴,一般用于在實(shí)驗(yàn)室范圍內(nèi)做有關(guān)營(yíng)養(yǎng)、代謝、菌種鑒定等有關(guān)于食用菌的生理生化研究。

    2、根據(jù)培養(yǎng)基制成后的物理狀態(tài),可將培養(yǎng)基分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。

    (1)液體培養(yǎng)基 根據(jù)食用菌所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),掃一定比例配成營(yíng)養(yǎng)液,叫液體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基可進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)源的篩選實(shí)驗(yàn),以及生理生化方面如酶活力等研究,應(yīng)用液體培養(yǎng)基生產(chǎn)的菌種也可在生產(chǎn)中進(jìn)行使用。

    (2)固化培養(yǎng)基 將各種營(yíng)養(yǎng)成份按比例配制成營(yíng)養(yǎng)液后,加入適量固化劑,如瓊脂,即可配成固化培養(yǎng)基。利用這種斜面試管可保藏及擴(kuò)大菌種,同時(shí)亦可制成各種平皿固化培養(yǎng)基分離菌種。

    (3)固體培養(yǎng)基 利用各種富含纖維素和木質(zhì)素的農(nóng)林廢棄物如木屑、棉籽殼、秸稈、玉米蕊等作為主要原料,再加入適量的米糠或麩皮和無(wú)機(jī)鹽類制成固體培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基可作為二、三、級(jí)菌種生產(chǎn)用的培養(yǎng)基,也可以用它制成發(fā)酵草粉保藏菌種用的培養(yǎng)基。

    二、一級(jí)種培養(yǎng)基

      一級(jí)種又稱母種,其培養(yǎng)基一般用試管作為容器,所以又稱試管斜面培養(yǎng)基,這類培養(yǎng)基又常用于菌種分離提純,擴(kuò)大,轉(zhuǎn)管及菌種保存等,下面列舉蘑菇菌種生產(chǎn)常用配方。

    1.馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)

    馬鈴薯(去皮) 200克 葡萄糖 20克 瓊脂 18-20克 水1000亳升

    2.馬鈴薯綜合培養(yǎng)基(CPDA)

    馬鈴薯200克 葡萄糖 20克 磷酸二氫鉀 3克 硫酸鎂 1.5克

    維生素B1 0.05毫克 瓊脂18-20克 水1000毫升

    3.馬鈴薯酵母膏培養(yǎng)基(PDYA)

    馬鈴薯200克 葡萄糖20克 酵母膏 1.5克 瓊脂 18-20克 水1000毫升

    4.麩皮葡萄糖培養(yǎng)基

    麩皮 50-70克 葡萄糖 20克 瓊脂 18-20克 水1000毫升

    5.堆肥浸汁葡萄糖培養(yǎng)基

    堆肥(干) 100克 葡萄糖20克 瓊脂 18-20克 水1000毫升

    6.玉米粉綜合培養(yǎng)基

    玉米粉 20-30克 葡萄糖 20克 磷酸氫二鉀 1克 硫酸鎂 0.5克

    蛋白胨 1克 瓊脂 18-20克 水1000毫升

    9.E.B.Lamberr 培養(yǎng)基

    葡萄糖 10克 硫酸鎂 0.5克 磷酸二氫鉀 1.9克 瓊脂 20克 水1000毫升

    適合于雙孢蘑菇的擔(dān)孢子萌發(fā)

    三. 二、三級(jí)種培養(yǎng)基

      二、三級(jí)種培養(yǎng)基通常采用天然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如秸稈、棉籽殼、蔗渣等農(nóng)作物廢物,加適量的無(wú)機(jī)鹽類等制成固體培養(yǎng)基,現(xiàn)將常用的培養(yǎng)基配方介紹如下。

    1.糞草培養(yǎng)基

    發(fā)酵麥稈72% 發(fā)酵牛糞粉20% 麩皮5% 糖1% 磷酸鈣1% 石膏1% 含水量62-65% 適合二級(jí)種

    2.牛糞粉培養(yǎng)基

    發(fā)酵牛糞粉98% 碳酸鈣2% 含水量62-65% 適合二級(jí)種

    3.棉籽殼培養(yǎng)基

    發(fā)酵棉籽殼97% 過(guò)磷酸鈣1% 碳酸鈣1% 石灰1% 適合二,三級(jí)菌種

    4.羊糞培養(yǎng)基

    干羊糞98% 碳酸鈣2% 含水量62-65% 適合二級(jí)種

    5.礦石培養(yǎng)基

    膨脹珍珠巖1450克 麩皮1650克 石膏粉200克 碳酸鈣50克 水1650克 pH6.2-6.4 適合二級(jí)種生產(chǎn)

    6.谷粒培養(yǎng)基

    麥粒(小麥,大麥,燕麥,高梁等)97% 碳酸鈣2% 石膏1% 含水量50-55% pH6.5- 7.0 適合二,三級(jí)種

    7.小麥稻谷培養(yǎng)基

    小麥88% 稻谷10% 碳酸鈣2% 適合三級(jí)種

    8.小麥牛糞粉培養(yǎng)基

    小麥88% 牛糞粉10% 碳酸鈣2% 適合三級(jí)種

     
     
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