草菇ras啟動子區(qū)域的克隆及其序列分析

Cloning and Sequence Analysis of ras Promoter Region from Volvariella volvacea

劉世強　楊麗卿　郭麗瓊　林俊芳　

摘　要：根據(jù)Kajiwara S[1]等報道的ras啟動子的序列設(shè)計并合成一對特異引物,以草菇菌絲的總DNA為模板,通過PCR擴增,獲得一條長約0.75kb片段.DNA序列測定結(jié)果表明,該片段長度為751bp.采用Blast軟件和Promoter predictions軟件進行啟動子序列結(jié)構(gòu)分析,結(jié)果表明,該片段中243～293 bp和539～589 bp兩區(qū)域為ras啟動子的基礎(chǔ)啟動子區(qū).在283bp和579bp處有兩個轉(zhuǎn)錄起始位點,在244～247bp和292～295bp之間有2個TATA box,在36～39bp、377～380bp、434～437bp和716～719bp之間有4個CAAT box.此外,該片段中還含有9個G box、12個Ⅰ box、2個P box以及3個重要順式作用元件:ABRE元件、WUN-motif(基元)和HSE元件.

關(guān)鍵詞：草菇; ras啟動子; PCR擴增; 序列分析

分類號：S646.130.6 　文獻標識碼：A

文章編號：1005-9873(2004)01-0001-06

基金項目：國家自然科學(xué)基金資助項目(30060054和30371000)、廣東省自然科學(xué)基金資助項目(032239)和華南農(nóng)業(yè)大學(xué)校長基金項目(5100-k03003)的部分研究內(nèi)容

作者簡介：劉世強(1978-),男,華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院在讀碩士研究生,主要從事食用菌的基因工程研究與開發(fā).林俊芳,本文通訊作者

作者單位：劉世強（中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物生物技術(shù)國家重點實驗室,海口,571701）　

　　　　　楊麗卿（中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物生物技術(shù)國家重點實驗室,海口,571701）　

　　　　　郭麗瓊（中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物生物技術(shù)國家重點實驗室,海口,571701;華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院生物工程系,廣州,510640）　

　　　　　林俊芳（中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物生物技術(shù)國家重點實驗室,海口,571701;華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院生物工程系,廣州,510640）　

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