【作者】楊星勇 王中康 夏玉先 盧曉風 裴炎

【機構】西南農業大學生物技術中心；

【摘要】以幾丁質為底物，加入基本鹽培養基中，誘導球孢白僵菌（Beauveriabassiana）產生分解昆蟲表皮的蛋白酶。誘導物中，蟬蛻誘導的蛋白酶總活性、比活較高，經超濾、離子交換層析、親和層析、制備性IEF電洗脫純化了一種有凝乳彈性蛋白酶（Pr1）活性的蛋白酶BbPr1。經SDS－PAGE電泳銀染后是單帶，HPLC凝膠過濾顯示單峰。BbPr1為單體酶，分子量為33.6kD左右，pI為7.4。底物專一性測定顯示，BbPr1能水解Phe或Leu形成的酸胺鍵和肽鍵。BbPrl可被PMSF抑制，表明其活性中心有Ser殘基；BbPr1還可被胰凝乳蛋白酶抑制劑TPCK和凝乳彈性蛋白酶抑制劑TEI等所抑制;胰蛋白酶抑制劑beupeptin和Epianstatin，及胃蛋白酶抑制劑Pepstain對BbPr1活性無影響。還研究了BbPr1的最適作用pH和pH穩定性。 

【基金】國家自然科學基金；

【關鍵詞】球胞白僵菌; 昆蟲病原真菌; 凝乳彈性蛋白酶; 純化; 特性;