【作者】丁一新 趙明文
【機構】南京農業大學生命科學學院農業部農業微生物環境工程重點開放實驗室南京農業大學生命科學學院農業部農業微生物環境工程重點開放實驗室 南京210095
【摘要】根據已報道的lz8基因序列設計引物,以靈芝基因組DNA為模板,PCR擴增獲得lz8基因。構建了原核表達載體pET30a-lz8,轉化原核表達宿主菌RosettaDE3,IPTG誘導融合蛋白表達,并用Ni-NTA親和層析柱對LZ-8蛋白進行分離純化。將純化的LZ-8蛋白用Freund佐劑乳化后注射到新西蘭白兔體內,經數次加強免疫后采血分離抗血清,并以抗血清為探針建立了LZ-8蛋白的免疫印跡法定性檢測方法。
【基金】國家自然科學基金(30300006,30571294)； 江蘇省自然科學基金創新人才項目(BK2006517)資助；
【關鍵詞】載體構建; 異源表達; Western雜交;