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    香菇SRAP擴增體系的建立與優化


    【發布日期】:2010-05-17

    付立忠; 魏海龍; 李海波; 吳慶其; 吳大豐; 吳學謙
    浙江省林業科學研究院生物技術研究所; 浙江省林業科學研究院生物技術研究所; 浙江省林業科學研究院生物技術研究所; 浙江省林業科學研究院生物技術研究所; 麗水市食用菌研究開發中心; 浙江省林業科學研究院生物技術研究所 杭州310023麗水市食用菌研究開發中心; 浙江益圣菌物發展有限公司; 麗水323000; 杭州310023麗水市食用菌研究開發中心; 浙江益圣菌物發展有限公司; 麗水323000; 杭州310023麗水市食用菌研究開發中心; 浙江益圣菌物發展有限公司; 麗水323000; 杭州310023麗水市食用菌研究開發中心; 浙江益圣菌物發展有限公司; 麗水323000; 浙江益圣菌物發展有限公司; 麗水323000; 杭州310023麗水市食用菌研究開發中心; 浙江益圣菌物發展有限公司; 麗水323000

    【中文摘要】 為了建立穩定的香菇(Lentinula edodes)SRAP(sequence-related amplified polymorphis m,相關序列擴增多態性)分子標記技術體系,以香菇(Lentinula edodes)為材料,采用SDS-CTAB(sodium dodecyl sulfate-cetylri methylammoniumbromide)法提取菌絲體基因組DNA,用瓊脂糖檢測擴增產物,篩選優化了SRAP擴增條件。可用于香菇SRAP分析的最佳PCR條件為20μL PCR反應體系中,模板DNA25ng,Buffer l×,Mg2+2.5mmol/L,dNTP Mixture0.2mmol/L,引物0.4μmol/L,Taq DNA聚合酶1.5U。優化后的SRAP體系目標條帶增多,重現性好。

    【中文關鍵詞】 香菇; 分子標記; 擴增體系優化; SRAP
    【基金】浙江省重點攻關項目“香菇種質資源保存利用與快速分類鑒定關鍵技術研究”(編號:2005C22057);; “生物技術在林木共生菌菌種快速分離鑒定上的應用研究”(編號:2004C22032);; 院所重大研發專項“森林食藥用真菌DNA指紋圖譜構建及其應用研究”(編號:2006F11003)的部分研究內容

    【文獻出處】 食用菌學報,Acta Edulis Fungi,編輯部郵箱,2006年04期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2006-04-002

     
     
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