何麗鴻; 于榮利; 陳明杰; 潘迎捷
中華人民共和國農(nóng)業(yè)部應(yīng)用真菌資源與利用重點開放實驗室; 上海市食用菌工程技術(shù)研究中心; 上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點實驗室; 上海市農(nóng)業(yè)科學院食用菌研究所; 南京農(nóng)業(yè)大學生命科學院微生物系; 上海海洋大學

【中文摘要】 采用化學裂解和酶解相結(jié)合的方法,以加入PVPP的高鹽緩沖液作為細胞裂解反應(yīng)體系,用PEG- 8000進行DNA沉淀.從雙孢蘑菇堆肥后發(fā)酵的4個代表時期培養(yǎng)料樣品中提取微生物總DNA,再以總DNA為模板,以專用引物F27和R1498進行PCR擴增,獲得16S rDNA片段,經(jīng)純化后構(gòu)建4個時期樣品的細菌16S rDNA文庫。試驗結(jié)果表明,本試驗獲得的總DNA質(zhì)量較好。采用PCR擴增可獲得多個細菌、放線菌和真菌特異片段;細菌16S rDNA文庫的目的片段插入效率在90%以上。

【中文關(guān)鍵詞】 雙孢蘑菇; 培養(yǎng)料后發(fā)酵; 細菌16S rDNA文庫
【基金】農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)科研專項項目“食用菌菌種質(zhì)量評價與菌種信息系統(tǒng)研究與建立”(編號：nyhyzx07-008)的部分研究內(nèi)容

【文獻出處】 食用菌學報,Acta Edulis Fungi,編輯部郵箱,2008年04期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2008-04-005