使用組織分離復壯平菇菌種，簡便易行、效果明顯，很適宜一般種植戶。其操作技術要點是：
　　1.　在菇床、菌墻或菌袋中選擇出菇早、無雜菌病毒侵染、株型緊湊、圓整肉厚、色澤美觀、七八成熟的第一潮菇的肥壯菇體作種菇；
　　2.　在種菇中部取最大的3-4張菇片，用70%的酒精輕擦表面后置于接種箱內消毒；
　　
　　3.　將菇片縱向撕開，在菇蓋與菇柄交界處取一米粒大小的菇肉組織接于PDA培養基上。每只菇片可接數支試管，每次應多分離幾支試管，方便選優；
　　4.　將試管置于適溫下培養；
　　5.　培養期間每天都要檢查發菌情況，從中選擇菌絲濃白粗壯、邊緣整齊、長速正常、無綠、黃及漿糊狀等雜菌斑點的，表現最好的分離種轉接于木屑麩皮培養基上，于適溫下培養；
　　6.　菌絲發滿后，在接種箱內去掉棉塞，用蠟封口，用黑膜包裹后于4-9℃的冰箱內保藏；
　　7.　在下一個生產季節與原始保藏種作對比試驗，擇優作為生產用種。每季都如此復壯，能逐步提高菌種各方面的性狀，使發菌加快，抗逆抗雜性增強，質量明顯提高。
　　8.　有條件的可以先采用孢子分離法進行分離培養，并栽培出菇，然后從中選擇較好的菇體（種菇選擇標準同上），再采用上述方法進行組織分離，其復壯效果更好。　注意：孢子分離的母種不能直接應用到生產中。