【作者】郭梅 蒲軍 杜連祥 路福平 白東清
【機構】天津科技大學生物工程學院工業微生物重點實驗室,天津科技大學生物工程學院工業微生物重點實驗室,天津科技大學生物工程學院工業微生物重點實驗室,天津科技大學生物工程學院工業微生物重點實驗室,天津科技大學生物工程學院工業微生物重點實驗室 天津300222天津農學院食品科學系天津300384,天津300222,天津300222,天津300222,天津300222天津農學院水產系天津300384
【摘要】以白腐菌雜色云芝Coriolus versicolor RNA為模板,通過RT-PCR獲得漆酶Leel基因的cDNA片段。構建了甲醇酵母表達質粒pmeta-Lccl載體,并將其線性化后用電穿孔法導入Pichia methabolica PMAD16,部分陽性克隆的PCR結果表明Lccl基因已經整合到甲醇畢赤酵母染色體上,經搖瓶培養篩選出表達水平較高的酵母工程菌株。漆酶酶活力達53U/L
【關鍵詞】cDNA; 載體的構建; 異源表達;
重組質粒pmeta一Lccl的酶切鑒定
異源表達;重組酵母基因組DNA
重組質粒pmeta一Lccl的酶切鑒定
異源表達;重組酵母基因組DNA
圖IRT一PcR產物的電泳結果