【作者】黃勃 汪章勛 樊美珍 李增智

【機構】安徽農業大學微生物防治省重點實驗室安徽農業大學微生物防治省重點實驗室 合肥230036

【摘要】粉擬青霉是一種常見的昆蟲病原真菌,被廣泛用于生物防治。根據GenBank中已登錄的淡紫擬青霉,球孢白僵菌和金龜子綠僵菌的類枯草桿菌蛋白酶基因序列的同源性比較,以它們高度保守的核苷酸序列設計一對引物,采用RT-PCR和3’/5’-RACE相結合的方法,首次從粉擬青霉中克隆出完整的類枯草桿菌蛋白酶cDNA基因。其全序列為2060bp,該序列5’-端和3’-端的非編碼序列長度分別為209bp和252bp,開放閱讀框為1599bp,編碼532個氨基酸,信號肽長度為16個氨基酸。成熟蛋白的氨基酸序列和金龜子綠僵菌小孢變種(CAB63913),玉米赤霉菌(EAA68914),金龜子綠僵菌蚱蜢變種(CAC95047)及柄孢殼(AAC03564)的同源性分別為69%、71%、68%和68%。成熟蛋白具有典型的絲氨酸蛋白酶活性位點,同時有5個半胱氨酸,3個潛在的N-糖基化位點和2個可能的O-糖基化位點。該基因在的密碼子第三位堿基的使用上,顯示出明顯的對C的偏愛。 

【基金】安徽省自然科學基金項目(00042208)； 安徽省優秀青年科技基金共同資助；

【關鍵詞】蟲生真菌; 粉擬青霉; 類枯草桿菌蛋白酶基因; cDNA;