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    蛹蟲草金屬硫蛋白分離純化及性質研究


    【發布日期】:2019-01-22  【來源】:菌物學報
    【作者】張琪 程顯好 郭文娟 劉鳳紅 王朝霞
    【機構】魯東大學菌物科學與技術研究院天津工業大學環境與化工學院
    【摘要】研究探討鋅離子脅迫下蛹蟲草Cordyceps militaris金屬硫蛋白的產生及性質。蛹蟲草菌絲體以15g/L Zn2+在10L發酵罐中誘導培養56h后收集,產率為每升發酵液收集12.021g菌絲體(干重),細胞破碎取上清液通過兩次凝膠柱層析,冷凍干燥得到蛹蟲草金屬硫蛋白純品。利用Bradford法進行蛋白質含量測定,用銀飽和分析法結合原子吸收光譜(AAS)測定MT含量,發酵終點處金屬硫蛋白含量為12.876mg/g菌絲體(濕重)。用電噴霧質譜法測得金屬硫蛋白的分子量為7 390Da,用Ellman’s方法和火焰原子吸收法分別測得每分子蛋白質含有14個巰基、結合5個Zn原子。氨基酸組成分析結果顯示,每分子蛋白質共含57個氨基酸,其中含有13個半胱氨酸,疏水氨基酸占29.8%,且含有組氨酸。以上表明,研究中的蛹蟲草金屬硫蛋白與哺乳動物金屬硫蛋白結構差異較大,但與酵母菌金屬硫蛋白結構組成類似。  
    【基金】山東省自然科學基金聯合專項(No.ZR2010CL005); 煙臺市科技發展計劃項目(No.2011069);
    【關鍵詞】蛹蟲草; 金屬硫蛋白; 鋅誘導; 氨基酸組成;
     
     
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