【作者】房麗麗 楊麗 李翠新 劉慶洪

【機構】西南林業(yè)大學生命科學學院 中國農(nóng)業(yè)大學生物學院

摘要：比對香菇(Lentinula edodes)Atg8蛋白基因的同源序列,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄PCR確定香菇Atg8的外顯子序列。構建其表達質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)ply S獲得其表達菌株。采用鎳柱和Mono Q純化表達的Atg8蛋白,成功制備兔多隆抗體。通過western-blotting對轉(zhuǎn)色前后Atg8蛋白的表達量進行對比。香菇Atg8蛋白基因長度為603 bp,Atg8蛋白分子量25 k Da左右,且為可溶性蛋白。轉(zhuǎn)色后的香菇Atg8蛋白雜交條帶較微弱,而轉(zhuǎn)色前雜交條帶幾乎沒有。表明轉(zhuǎn)色后的香菇菌絲Atg8表達量比轉(zhuǎn)色前含量高。 

基金：國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)技術產(chǎn)業(yè)體系食用菌產(chǎn)業(yè)專項(CARS-024)；

關鍵詞：香菇; 轉(zhuǎn)色; 自噬; Atg8;