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    抑制消減雜交法分離與鑒定靈芝G蛋白β亞基基因


    【發布日期】:2012-06-12

    【作者】 徐軍偉; 趙蔚; 鐘建江;

    【機構】 華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室; 上海交通大學微生物代謝國家重點實驗室;

    【摘要】 靈芝細胞在液體靜置和振蕩培養方式下,抗癌物質靈芝酸的產量有顯著的差別。采用抑制消減雜交法分離了靈芝細胞在兩種不同培養方式下差異表達的基因,對構建的差減文庫進行篩選后獲得了一個靈芝的EST序列。根據這個EST序列,采用RACE-PCR的方法成功克隆到了靈芝G蛋白β亞基(Gb)基因(GenBank登錄號GQ293361)。序列分析顯示這個基因cDNA全長1217bp,編碼了313個氨基酸。同源性分析表明其編碼的氨基酸與其他蘑菇類真菌Gβ的氨基酸序列同源性較高,與Coprinopsis cinerea(XP001830441.1)、Lentinula edodes(AAP13580.2)和Schizophyllum commune(XP003029882.1)的一致性分別達到91%、91%和90%。實時熒光定量PCR結果表明這個基因在液體靜置培養方式下的表達量顯著高于振蕩培養。

    【關鍵詞】 靈芝G蛋白β亞基; 差異表達;
     
    【基金】 國家自然科學基金“靈芝真菌液體靜態培養過程中靈芝酸積累的調控研究”(20776084)

    【分類號】S567.31
     

     
     
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