【作者】李美娜 吳謝軍 李春燕 馮伯森 李慶偉

【機構】遼寧師范大學生命科學學院 大連雙天新藥研究開發中心 遼寧師范大學生命科學學院 大連116029 大連116031

【摘要】利用PCR-RFLP和RAPD方法對野生馴化蛹蟲草及其退化菌種進行了基因水平的分析。PCR-RFLP實驗,采用真菌通用引物ITS1和ITS4,擴增出5.8S和其兩端的兩個轉錄間隔區(ITS),選用5種識別四個堿基的內切酶(HaeIII、AfaI、TagI、AluI和XspI),其中只XspI酶切結果在兩個菌種中存在差異,進一步測序表明,整個片段全長534bp,共有13個位點發生堿基突變,且都為c轉換為t。RAPD實驗,選用4組計80個隨機引物進行PCR擴增,共篩選出9個對所有供試個體均存在明顯差異的引物。結果表明了退化菌株較野生馴化菌株在DNA水平上發生了頻率較高的突變,這些突變可能直接與導致菌種退化的基因相關聯。 

【基金】大連市科技局重點推廣項目:(2002—05)；

【關鍵詞】馴化菌株; 退化菌株; 5.8SrRNA; RFLP; RAPD;