【作者】楊娟 鄒亞杰 張瑞穎 胡清秀
【機構(gòu)】中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與農(nóng)業(yè)區(qū)劃研究所
摘要：為了探索白靈側(cè)耳Pleurotus eryngii var.tuoliensis漆酶性質(zhì),以白靈側(cè)耳菌株00485為試驗材料,從發(fā)酵液中分離純化得到胞外漆酶并對其酶學(xué)性質(zhì)進行測定。純化流程依次為DEAE-Cellulose陰離子交換層析,CM-Cellulose陽離子交換層析,SP-Sepharose強陽離子交換層析以及Superdex 75凝膠過濾層析,獲得胞外白靈側(cè)耳漆酶(Pn Lac)。SDS-PAGE檢測結(jié)果表明Pn Lac為65k Da的單一蛋白。Pn Lac經(jīng)過胰蛋白酶水解得到3種肽段,經(jīng)過NBCI-BLAST后發(fā)現(xiàn)它們與糙皮側(cè)耳、環(huán)柄韌傘、刺芹側(cè)耳等的漆酶具有同源性。底物為2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)時該種漆酶的最適反應(yīng)溫度和p H分別為50℃和3.0,Ca2+和Hg2+能夠抑制它的活性,相反地Cu2+和Mn2+能夠提高它的活性,米氏常數(shù)Km和Vmax分別是0.17mmol/L和1.76OD/min/U。
基金：國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項資金(CARS 24)； 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程；
關(guān)鍵詞：白靈側(cè)耳; 漆酶; 分離純化; 酶活;
【機構(gòu)】中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與農(nóng)業(yè)區(qū)劃研究所
摘要：為了探索白靈側(cè)耳Pleurotus eryngii var.tuoliensis漆酶性質(zhì),以白靈側(cè)耳菌株00485為試驗材料,從發(fā)酵液中分離純化得到胞外漆酶并對其酶學(xué)性質(zhì)進行測定。純化流程依次為DEAE-Cellulose陰離子交換層析,CM-Cellulose陽離子交換層析,SP-Sepharose強陽離子交換層析以及Superdex 75凝膠過濾層析,獲得胞外白靈側(cè)耳漆酶(Pn Lac)。SDS-PAGE檢測結(jié)果表明Pn Lac為65k Da的單一蛋白。Pn Lac經(jīng)過胰蛋白酶水解得到3種肽段,經(jīng)過NBCI-BLAST后發(fā)現(xiàn)它們與糙皮側(cè)耳、環(huán)柄韌傘、刺芹側(cè)耳等的漆酶具有同源性。底物為2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)時該種漆酶的最適反應(yīng)溫度和p H分別為50℃和3.0,Ca2+和Hg2+能夠抑制它的活性,相反地Cu2+和Mn2+能夠提高它的活性,米氏常數(shù)Km和Vmax分別是0.17mmol/L和1.76OD/min/U。
基金：國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項資金(CARS 24)； 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程；
關(guān)鍵詞：白靈側(cè)耳; 漆酶; 分離純化; 酶活;