【作者】楊娟 鄒亞杰 張瑞穎 胡清秀
【機構】中國農業科學院農業資源與農業區劃研究所
摘要：為了探索白靈側耳Pleurotus eryngii var.tuoliensis漆酶性質,以白靈側耳菌株00485為試驗材料,從發酵液中分離純化得到胞外漆酶并對其酶學性質進行測定。純化流程依次為DEAE-Cellulose陰離子交換層析,CM-Cellulose陽離子交換層析,SP-Sepharose強陽離子交換層析以及Superdex 75凝膠過濾層析,獲得胞外白靈側耳漆酶(Pn Lac)。SDS-PAGE檢測結果表明Pn Lac為65k Da的單一蛋白。Pn Lac經過胰蛋白酶水解得到3種肽段,經過NBCI-BLAST后發現它們與糙皮側耳、環柄韌傘、刺芹側耳等的漆酶具有同源性。底物為2,2-聯氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)時該種漆酶的最適反應溫度和p H分別為50℃和3.0,Ca2+和Hg2+能夠抑制它的活性,相反地Cu2+和Mn2+能夠提高它的活性,米氏常數Km和Vmax分別是0.17mmol/L和1.76OD/min/U。
基金：國家現代農業產業技術體系建設專項資金(CARS 24)； 中國農業科學院科技創新工程；
關鍵詞：白靈側耳; 漆酶; 分離純化; 酶活;