易菇網(wǎng)訊：“建議生產(chǎn)用蟲草類真菌不僅需要形態(tài)鑒定，還需要采用分子生物學手段鑒定到種和菌株。”10月26日，在2018第二屆全國蟲草大會“泛亞·蟲草產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇”環(huán)節(jié)中，浙江泛亞生命科學研究院副院長李春如在談及菌株的影響問題時說道。會上，李春如從菌（種）株、質(zhì)量控制、研發(fā)思路和策略探討等方面向與會代表介紹了藥食用蟲草類真菌在研發(fā)和生產(chǎn)過程中等遇到的相關(guān)問題。

　　“菌種的影響是非常重大的，以食用安全性為例，不同真菌物種因為各自基因差異，其編碼的產(chǎn)物千差萬別。有些具營養(yǎng)保健功能，而有些真菌堪稱毒藥，如毒蘑菇，真菌的產(chǎn)毒素是由基因所控制，其產(chǎn)毒素能力受真菌種類及菌株、基物類型、環(huán)境條件等因素影響。”李春如表示，產(chǎn)生毒素的真菌種類主要有曲霉菌屬（Aspergillus）、鐮刀菌屬（Fusarium）、青霉屬（Penicillium）這三類真菌。

　　李春如還向現(xiàn)場的代表介紹了三種真菌的相關(guān)情況。他表示，很多曲霉菌引起農(nóng)產(chǎn)品、食品和飼料發(fā)霉變質(zhì)，共有15種曲霉菌產(chǎn)生24種毒素。以黃曲霉菌最為普遍，且所產(chǎn)毒素毒性最大，具強烈的致癌性，產(chǎn)生的毒素主要是香豆素類和丁烯酸內(nèi)酯化合物以前者最多；鐮刀菌本屬真菌分布甚廣，且多為腐生，但有不少種是重要的植物病原菌，也有少數(shù)是人和動物的條件致病菌，其中有16種鐮刀菌產(chǎn)生18種毒素，主要是酚大環(huán)內(nèi)酯和單端霉烯族化合物，以后者最多；青霉菌本屬真菌，種類多，分布極廣。青霉菌有很大經(jīng)濟價值，許多是有害菌，引起糧食、食品、飼料、水果霉變，共有28種青霉菌產(chǎn)生34種毒素，尤以米上最多，其次是谷類及制成品，如餅，醬團和飼料。毒素種類及化學組成最多，主要是蒽醌、丁烯酸內(nèi)酯、環(huán)氯肽、吡喃酮及吡喃結(jié)構(gòu)的化合物。“除了這三種之外，還有麥角菌、稻曲病菌、綠色木霉、交鏈孢、葡萄穗狀霉、漆斑霉菌、長蠕孢霉，球毛殼菌、絲核菌、節(jié)卵斑霉、頭孢霉、交鏈孢、粉紅單端孢霉、黑附球霉和芽枝霉等其它產(chǎn)毒真菌。”

　　報告中，李春如表示蟲草類真菌在栽培過程中會受到其它真菌的污染或者原料帶入，需要對栽培過程進行精確控制、有效防控污染、進行全程監(jiān)控、沉降菌檢測、和相關(guān)真菌毒素的檢測。另外，由于上游菌種鑒定方面的原因，有時不能正確區(qū)分標稱的蟲草類真菌與其近似種的親緣關(guān)系，有潛在的健康威脅。

　　在談及菌株的影響問題時，李春如認為同一菌種不同菌株間常表現(xiàn)出遺傳多樣性，其代謝產(chǎn)物也有明顯差異。同一種產(chǎn)毒素真菌，菌株間產(chǎn)毒的差異很大，如產(chǎn)黃曲霉毒素的黃曲霉菌不是所有菌株都產(chǎn)毒，據(jù)Matles報導，自然界中的野生菌株只有10%能產(chǎn)毒素。禾谷鐮刀菌菌株間產(chǎn)毒素的能力也存在很大差異，對原四川11個代表菌株產(chǎn)生二種毒素量的研究結(jié)果表明最高的是最低的十倍。以高雄山蟲草為例，供試的兩個來源于中國的菌株表現(xiàn)出急性毒性，而韓國的菌株栽培的高雄山蟲草（韓國又稱雪花蟲草）獲得了韓國的新食品原料證書，獲準上市銷售。“針對這種情況，建議生產(chǎn)用蟲草類真菌不僅需要形態(tài)鑒定，還需要采用分子生物學手段鑒定到種和菌株。”

　　報告中，李春如還向與會代表介紹了同一菌株的傳代次數(shù)及退化的影響。他講到，同一菌株在不同培養(yǎng)工藝中其代謝組差異較大，除此之外，即使是同一工藝隨著傳代次數(shù)的增加，不僅在菌落形態(tài)和生長速率等生物學性狀上表現(xiàn)異常，而且在產(chǎn)孢梗束能力和目標活性物質(zhì)產(chǎn)量等生產(chǎn)性狀也出現(xiàn)下降的退化現(xiàn)象。對蟬花在人工培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)菌株的生物學特性的研究結(jié)果表明：蟬花菌株在人工培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)過程中生物學性狀表現(xiàn)出階段性的變異，菌株的產(chǎn)孢量隨著傳代次數(shù)的增加而下降，菌絲生長速度先隨傳代次數(shù)增加而加快，第8代之后生長速度減緩。第8、9代是蟬花菌株繼代培養(yǎng)的轉(zhuǎn)折階段。總的來看，繼代培養(yǎng)過程中菌落局變頻率沒有規(guī)律可循，其變異具有菌株的特異性。

　　“不同的培養(yǎng)基配方對產(chǎn)毒水平影響顯著。如黃曲霉菌在花生、玉米、堅果等種子上產(chǎn)毒素能力最大，但在黃豆種子上則產(chǎn)生毒素少。伏馬毒素在玉米上產(chǎn)毒素多，大米上產(chǎn)毒素低。”談及不同培養(yǎng)條件對產(chǎn)品的影響問題時，李春如表示環(huán)境影響產(chǎn)毒菌的生長，也影響產(chǎn)毒量。影響因素有溫度、濕度、CO2、O2等。一般說來，溫度和濕度低可減少毒素，CO2從0.03%到100%，隨CO2增加，毒素含量降低。氧從5% 降到1%可使毒素明顯降低。在溫暖潮濕地區(qū)，花生仁被黃曲霉污染嚴重，而且產(chǎn)毒菌株的比例高。又如產(chǎn)玉米赤霉烯酮毒素的禾谷鐮刀菌，在變溫條件下25oC培養(yǎng)二周，再在12oC下培養(yǎng)8周產(chǎn)毒量最大。一般環(huán)境濕度大，基物水份含量高，產(chǎn)毒量高。谷物破損嚴重及霉變程度愈高，農(nóng)產(chǎn)品和食品中的毒素含量愈高，而健康飽滿的小麥抵御產(chǎn)毒菌的侵害越強，帶菌量極少，樣品中檢測不到真菌毒素。

　　報告最后，李春如就泛亞在研發(fā)和生產(chǎn)蟬花過程中如何控制幾個關(guān)鍵點做了介紹。他表示，浙江泛亞公司為準確鑒定對于采集分離的蟬花菌種做了大量研究，例如采用經(jīng)典的形態(tài)鑒定方法結(jié)合18S rDNA ITS序列比對保證菌種鑒定的準確性，應用RAPD和SCAR方法對生產(chǎn)菌株進行分子標記研究等。他還介紹了泛亞在防菌種變異、退化和復壯措施以及制定嚴格的全面質(zhì)量控制的SOP操作規(guī)程，對關(guān)鍵環(huán)節(jié)重點把控等相關(guān)措施。

　　2018第二屆全國蟲草大會于10月25-27日在杭州龍湖皇冠假日酒店舉行，會議由中國菌物學會主辦，真菌學國家重點實驗室、易菇網(wǎng)、中國菌物學會菌物產(chǎn)業(yè)分會、中國菌物學會蟲生真菌專業(yè)委員會、杭州中美華東制藥有限公司承辦，浙江五養(yǎng)堂藥業(yè)有限公司、杭州寶臻生物技術(shù)有限公司、浙江泛亞生物醫(yī)藥股份有限公司協(xié)辦，武漢菌博會展服務有限公司承擔會務執(zhí)行。本次大會圍繞“直面蟲草產(chǎn)業(yè)的挑戰(zhàn)與機遇”主題，安排有學術(shù)交流會，蟲草產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇、冬蟲夏草產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇、蛹蟲草產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇、蟲草產(chǎn)業(yè)企業(yè)家論壇，蟲草產(chǎn)業(yè)新產(chǎn)品新技術(shù)展覽，并組織代表前往杭州中美華東制藥有限公司進行參觀，同期還舉行了“中國菌物學會蟲草類產(chǎn)業(yè)分會”成立籌備會議。本次大會凝聚了蟲草行業(yè)最權(quán)威的專家以及最具實力的企業(yè)家，與會人員提出我國蟲草產(chǎn)業(yè)產(chǎn)值突破千億元指日可待，是蟲草行業(yè)具有歷史意義的一次盛會。