【作者】李鐘慶；元偉；

【機構】中國科學院微生物研究所；中國科學院微生物研究所；北京；

【摘要】本文報告用液氮超低溫(-196℃)凍結和融化后,對酵母菌的影響。34種酵母菌經慢速(冷卻速度為1℃/min)凍結后細胞成活率普遍高于快速(冷卻速度為450℃/min)凍結。10%甘油和10%二甲亞砜比水在凍結中呈現出顯著的保護作用。凍結保藏4個月后,細胞成活率都在11%以上,最高達97%,平均70.4%,而水,最低者僅0.4%,最高87%,平均46.5%。所觀察的白地霉 Geotrichum candidum As 2.361,橢圓釀酒酵母 Saccharomyces cere-visiae var.ellipsoideus AS 2.541,八孢裂殖酵母 Schizosaccharomyces octosporus AS 2.1148,其細胞在凍結過程中的形態,最初質壁分離,繼之整個細胞收縮,而融化后則可復元.解脂假絲酵母 Candida lipolytica AS 2.1207和2.1405經凍結48小時以上,融化后的細胞懸液直接接種培養后檢測脂肪酶活力;釀酒酵母 Saccharomyces cerevtsiae AS 2.399和橢圓釀酒酵母 As 2.541凍結48小時后乙醇發酵力;異常漢遜酵母 Hansenula auomala AS 2.300和 AS 2.470凍結后形成乙酸乙酯的能力,都無明顯的減退,而且以甘油作保護劑的細胞,較未經凍結者呈現出稍強的活力。就代謝產物而言,用氣相色譜法分析發酵液,乙醇或乙酸乙酯都是很純的終產物。嗜滲壓的固囊酵母 Citeromyces matritensis AS 2.1401和漢遜德巴利酵母 Debaryomyceshansenii AS 2.45凍結后的細胞耐 NaCl 的能力無改變.冷凍真空干燥法保藏菌種,適合的菌類較廣,是久經考驗的方法。但是對于酵母菌凍干后細胞成活率平均為8.6%,而超低溫凍結24小時細胞成活率平均為86.7%,大了10倍。 

【關鍵詞】液氮；超低溫凍結；融化；存活力；成活率；