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    農(nóng)桿菌介導的紅曲菌T-DNA插入突變庫的構建及色素突變子的性質(zhì)分析


    【發(fā)布日期】:2018-03-27  【來源】:菌物學報
    【作者】邵彥春 王汝毅 丁月娣 陳福生 謝筆鈞
    【機構】華中農(nóng)業(yè)大學食品科技學院 華中農(nóng)業(yè)大學食品科技學院 武漢430070
    【摘要】以農(nóng)桿菌EHA105為介導,將帶有潮霉素抗性基因和gus基因的T-DNA片段轉(zhuǎn)化到紅色紅曲菌(Monascusruber)中。通過轉(zhuǎn)化條件的優(yōu)化,成功構建了含有5132個轉(zhuǎn)化子的T-DNA插入突變庫。根據(jù)菌落顏色與色素分泌情況篩選到50株色素突變子,聚合酶鏈式反應(PCR)表明上述突變子均有T-DNA片段插入。經(jīng)5代的繼代培養(yǎng)后,94%的突變子具有穩(wěn)定性(潮霉素抗性)。對突變子產(chǎn)色素和桔霉素能力的分析表明其分泌次生代謝產(chǎn)物的能力發(fā)生了較大變化。本方法的建立,為進一步深入研究紅曲菌的代謝調(diào)節(jié)和基因功能奠定了基礎。 
    【基金】湖北省科技廳資助項目(2001AA214B03);
    【關鍵詞】紅色紅曲菌; 表型; 桔霉素;
     
     
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